免费在线预览全文T-载体PCR 产物克隆试剂盒 产品编号:SK2213/SK2214 包装规格:20 次/100 次 试剂盒组成 组分 SK2213,20 次 SK2214,100 次 T Vector 1 µg 5 µg 10×Ligation Buffer 50 µl 200 µl 50% PEG 4000 50 µl 200 µl T4 DNA Ligase, 5 U/µl 100 U 500 U Sterilized ddH O 1 ml 1 ml 2 操作手册 1 份 1 份 保存方法及注意事项 该产品低温运输,-20°C 保存,有效期见包装。 产品介绍 pUCm-T Vector 是一种高效克隆PCR 产物(TA Cloning )的专用载体。本载体由pUC 系列载体改建而成,在pUC 载体 的多克隆位点处插入特殊的限制性内切酶识别位点,酶切后能在载体的3’端形

用这种方法制备的T-vector的不同之处在于前者3'末端不能与待克隆PCR产物的5'末端连接,仅 5'末端可与PCR产物的3'末端形成磷酸二脂键。. 此D

刷刷题APP(shuashuati.com)是专业的大学生刷题搜题拍题答疑工具,刷刷题提供___载体是一种高效克隆 PCR产物的专用载体,由pUC18载体改建而成,在 pUC18载体的多克隆位点处的XbaI和SalI识别位点之间插入了EcoRV识别位点,用 EcoRV进行酶切反应后,再在两侧的3′端添加“T”而成。的答案解析,刷刷题为用户提供专业的考试题库练习。一分钟将考试题Word文档/Excel文档/PDF文档转化为在线题库,制作自己的电子错题本,提高学习效率。考试刷题就用刷刷题APP。 大学职业资格刷题搜题APP 下载APP 课程 玩着学单词 题库模板 WORD模板下载 EXCEL模板下载 视频教程

用此载体直接与PCR产物连接进行克隆.克隆效率比采用平端载体克隆的效率提高约50倍 .

扩增的PCR产物如利用T-Vector进行克隆,可直接使用,如用平未端或粘性未端连接,往往需要将产物纯化。.(9)简并引物应选用简并程度低的密码子, 例如选用只有一种密码子的Met, 3'端应不存在简并性. 该系统中含有的试剂和柱子可供50次PCR产物的纯化,试剂包括:50 ml Wizard PCR DNA纯化树脂、5 ml 直接提取缓冲液、50支 Wizard微型柱。.

CAT为模板进行靶向克隆所需的人CATcDNA扩增.将纯化的人CATcDNAPCR产物与经XhoⅠ和BamHⅠ酶切的线性化载体pET15b以6:1摩尔数之比混合于含重组酶的反应液中,25℃反应30min,将PCR产物定向克隆于目标载体pET15b上,获得重组质粒pET15b-CAT.重组质粒经PCR,XhoI酶切和DNA测序鉴定.影响:人CATcDNA的PCR扩增产物与经XhoⅠ和BamHⅠ酶切的线性化载体pET15b发生了同源重组反应,经鉴定采用PCR产物靶向克隆法成功构建了pET15b-CAT.判断:PCR产物靶向克隆法是一种简便,高效地将PCR产物定向克隆于目标载体的方法,而无需对PCR产物进行酶切,末端抹

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产物不经过酶切,直接快速,定向克隆入任何载体的产物不经过酶切,直接快速,定向克隆入任何载体的方法方法默认分类,阅读评论字号,大中小订阅上海捷瑞生物工程有限公司提供的定向克隆同源重组试剂盒,专门为把产物快速,定向,有效的克隆到任何目标载体而设

酶切位点 ;用 Xcm I酶切质粒 pMD - 18Tman2Xcm I可以制备 T 载体 . 而聚合酶链反应 ( PCR)是强有力的基因克隆方法 ,为了直接克隆 PCR产物 ,.载体.常用的PCR产物克隆方法有粘端和平端连接方法[1].但在实际使用中,上述方法均不尽人意.前者因酶切位点位于片段的5’或3’末端,酶切效率低,由此影响连接后果;后者因PCR产物不是平端使连接后果也不理想.本文中,我们制备了可用于克隆PCR产物的

T载体是可以直接克隆或表达PCR产物的新型载体,重组过程中无需酶切和纯化,简便高效[1].T载体是用于直接克隆PCR产物的一种新型载体,它的分子末端各有一个3′ dT (脱氧胸苷)突出,恰好可以与PCR产物末端由于Taq DNA聚合酶非模板依赖的末端转移酶活性而添加的dA (脱氧腺苷)互补配对,这样可以将PCR产物.